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盡管進(jìn)行了有大量的研究,但是細(xì)胞外囊泡(EVs)的純化仍然很困難。塞爾維亞科學(xué)家Bojana Milutinovic等比較了離子交換層析法和常用的蔗糖密度梯度離心法對(duì)EVs的純化效果。差速離心之后通過(guò)離子交換層析或蔗糖密度梯度離心可以分離到正常人羊水中大量的EVs。通過(guò)電泳和凝集素印跡或者免役印跡檢測(cè)總蛋白、不同EVs標(biāo)志物以及已知污染物的分布來(lái)評(píng)估分離的EVs的純度。研究結(jié)果表明,其他不同電荷分子中帶負(fù)電荷的EVs得到有效分離,通過(guò)比較分析,離子交換層析在EVs分離上的效果優(yōu)于蔗糖密度梯度離心。盡管這種離子交換層析的方法是利用羊水來(lái)驗(yàn)證的,但是這種方法同樣適用于其他來(lái)源樣本中EVs的分離。
原文:
Bojana Milutinovic, Sanja Goc et al. Ion-exchange chromatography purification of extracellular vesicles. Maja Kosanovic , BioTechniques 63:65-71 (August 2017).